基因工程試劑 BL21（DE3）感受態(tài)細胞
貨號：C1400
規格：10×100ul / 20×100ul
保存：-70℃保存，運輸為干冰包裝。自收貨之日起液氮保存少一年，-70℃保存少 6 個(gè)月。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本公司生產(chǎn)的BL21（DE3）感受態(tài)細胞是采用大腸桿菌BL21（DE3）菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA的化學(xué)轉化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測，轉化效率可達 10 7 ，-70℃保存 6 個(gè)月轉化效率不改變。
基因型：F_ ompT hsdSB（rB_mB_）dcm gal（DE3）
特 點(diǎn)：該菌株用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動(dòng)子的表達載體（如 pET 系列）的基因。T7 噬菌體RNA 聚合酶位于 λ 噬菌體 DE3 區，該區整合于 BL21 的染色體上。該菌適合表達非毒性蛋白。

操作方法：  （以下各步驟均為無(wú)菌操作）
1、將感受態(tài)細胞置于冰上融化，以下實(shí)驗以 100ul 感受態(tài)細胞為例。
2、向感受態(tài)細胞懸液中加入需轉化的目的 DNA，注意目的 DNA 的體積不要超過(guò)感受態(tài)細胞懸液體積的十分之一，輕輕旋轉離心管以混勻內容物，冰浴放置 30 分鐘。
3、將離心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒，然后快速轉移到冰浴中放置 2-3 分鐘，注意不要搖動(dòng)離心管。
4、向離心管中加入 500ul 無(wú)菌無(wú)抗的 SOC 或 LB 培養基，37℃ 180rpm 振蕩培養 1 小時(shí)。目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標記基因表達，使菌體復蘇。
5、取適量已轉化的感受態(tài)細胞涂布含相應抗生素的 SOC 或 LB 平板，37℃倒置培養 12-16 小時(shí)。涂布用量可根據具體實(shí)驗來(lái)調整，如轉化的 DNA 總量較多，可取 100ul 左右的轉化產(chǎn)物涂板；反之，如轉化的 DNA總量較少，可取 200-300ul 的轉化產(chǎn)物涂板。過(guò)多菌液可以抑制細菌生長(cháng)。如果預計的克隆較少，可通過(guò)離心后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于一個(gè)平板中。涂布剩余的菌液可 4℃保存，如果次日的轉化菌落數過(guò)少可以將剩下的菌液再涂布新的平板。

注意事項：
1、感受態(tài)細胞應保存在-70℃，不可反復凍融，否則其轉化效率將會(huì )降低。
2、實(shí)驗過(guò)程中應嚴格無(wú)菌操作，防止其它 DNA 或雜菌的污染，避免為以后的篩選、鑒定帶來(lái)影響。
3、轉化時(shí)，轉化效率與外源 DNA 的濃度在一定范圍內成正比，但當加入的外源 DNA 量過(guò)多或體積過(guò)大反而會(huì )降低轉化效率。轉化時(shí) DNA 體積要小于感受態(tài)細胞體積的十分之一。
4、轉化率的計算：轉化率＝產(chǎn)生菌落的總數/鋪板 DNA 總量。
5、為防止轉化實(shí)驗不成功，可以保留部分連接產(chǎn)物，以重新轉化，將損失降到低。

相關(guān)產(chǎn)品：
I1020  IPTG  溶液 (50mg/ml)
A1170 氨芐青霉素儲存液 (100mg/ml)
K1030  Kanamycin (100mg/ml) 卡那霉素
L1015  LB 固體培養基 ( 干粉 )
L1020  SOC 液體培養基 ( 干粉 )
X1010  X-gal(20mg/ml)

基因工程試劑 BL21（DE3）感受態(tài)細胞訂購說(shuō)明：
1、絕大部分產(chǎn)品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
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3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì )因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當日新價(jià)格為準。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后，將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

運輸說(shuō)明：
1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運輸過(guò)程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩定如一，為您的實(shí)驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩定如一，為您的實(shí)驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。